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固相萃取技術在體內藥物分析中的應用
發(fā)布時間: 2021-09-13  點擊次數(shù): 690次

固相萃取技術在體內藥物分析中的應用

        固相萃取技術廣泛應用于體內藥物分析。由此,充分學習固相萃取的基本原理、填料的種類和自動化操作等,可以更好地幫助我們進行藥物分析。
        近年來,由于高效液相色譜特別是反相高效液相色譜的成功應用,人們利用色譜理論,采用不同填料的小柱進行樣品制備固相萃取(又稱液2固萃?。?. ) 技術 (SPE) 越來越受到關注。由此,充分學習固相萃取的基本原理、填料的種類和自動化操作等,可以更好地幫助我們進行藥物分析。
         SPE基本原理
        不同的填料用作微柱的固定相。當含有藥物的生物樣品溶液通過時,由于“吸附"或“分配"或“離子交換"或其他親和作用,藥物或雜質被保留在固定相上,雜質被適當?shù)南慈ト軇?,然后用適當?shù)娜軇┫疵撍幬铩?/span>
        有兩種洗脫方法:
        一是藥物比雜質和固定相有更強的親和力,所以被保留下來,然后用對藥物親和力更強的溶劑洗脫;
        另一個如果雜質與藥物和固定相之間的親和力更強,則藥物被直接洗脫。通常使用前一種模式。
         SPE 填料類型和萃取機制
        SPE 技術的核心是填料。填料的種類很多,可分為親油性、親水性和離子交換型。根據(jù)所用固相萃取劑的種類,固相萃取方法可分為正相、反相和離子交換固相萃取三類。在生物制藥分析中,反相和離子交換固相萃取是常用的方法。固相萃取的作用機制主要包括非極性相互作用(分散相互作用)、極性相互作用(氫鍵相互作用、偶極矩和誘導偶極相互作用等)、離子相互作用和共價相互作用。目前,隨著新型固相萃取劑的應用,由于多種作用機制的綜合應用,各種固相萃取方法的應用范圍不斷擴大。
         SPE技術進展
        SPE技術固有的優(yōu)勢使其在生物樣品的分析中得到越來越廣泛的應用。其新型固定相萃取劑和自動化操作設備的研究和應用取得新進展。
         1、新型固相萃取劑
        擴大萃取劑的應用范圍,即提高固相萃取的通用性。因此,極性、非極性基團、離子(陰離子、陽離子)交換基團得分還是很高的。
        固相萃取的填料更具選擇性。苯基硼酸 (PBA) 鍵合相硅膠用于選擇性萃取血漿中的一系列 β2 拮抗劑。其作用機制在于藥物與填充劑之間的共價鍵,更專門地保留了藥物的含醇羥基。
         2.SPE自動化操作
     體內藥物分析的樣本量是相當大的,這就決定了如果不嘗試實現(xiàn)自動化,大量重復性操作難免需要人工完成。該過程復雜、耗時且成本高。人類。因此,即使是單次操作相對省時的前處理技術SPE,也非常有必要大力發(fā)展其自動化技術。
        早期的自動化固相萃取系統(tǒng)采用樣品的連續(xù)進樣。在一個樣品完成洗脫過程后,可以注入另一個樣品,這需要很長時間。進入90年代后,自動并行操作固相系統(tǒng)得到推廣。使用這樣的裝置,固相萃取的速度遠遠超過人工操作。自動化程度高,可與HPLC或LC2MS結合,實現(xiàn)在線樣品前處理的特點,使固相萃取技術可廣泛應用于組合化學、藥物篩選等高通量領域。
         SPE在體內藥物分析中的應用
        隨著技術的進步,固相萃取以其高效、高提取率、簡便等優(yōu)點在體內藥物分析中得到越來越多的應用,豐富了生物樣品前處理的方法。 .與液液萃取相比,SPE操作簡單、耗時、省試劑、無污染。因此,許多分析人員嘗試使用這種方法并獲得良好的結果。
         (1)測定人血漿中地塞米松濃度時,采用Oasis HLB C18固相萃取小柱對血漿樣品進行預處理,簡單快捷。只需經(jīng)過簡單的固相萃取,只需對每個樣品的分析時間。 9分鐘,節(jié)省試劑,回收率高,滿足臨床測定人血漿地塞米松濃度的要求。
         (2)血漿皮質醇的研究中,沒有采用我國常用的二氯甲烷提取標本和放射免疫法。由于工作人員接觸有毒試劑,同位素也會污染環(huán)境,只能進行一次測量。對于一種物質,采用固相萃取技術,應用高效液相色譜法可以同時測定血漿中ke的松和皮質醇兩種物質,分離效果令人滿意。 SPE 的優(yōu)點之一是在生物樣品的前處理過程中引入的雜質少,回收率高。
         (3)血漿中抗癲癇藥物的測定采用固相萃取的預處理方法,與傳統(tǒng)的液-液法比較提取方法簡單,耗時少:比較兩種方法提取的同一血漿的含量測定色譜圖,可以看出SPE樣品的雜質明顯減少,可以減少色譜柱的污染并延長其使用壽命。
         SPE 技術的出現(xiàn)極大地簡化了生物樣品處理過程。采用自動化SPE,真正實現(xiàn)了生物樣品的在線分析。以其高效、高選擇性、自動化程度高等特點,廣泛應用于體內藥物分析中的各種原始樣品。分離純化。但需要注意的是,固相萃取技術在使萃取劑更具選擇性和通用性方面還有一定的差距。自動化預處理技術的應用還不夠廣泛,有待進一步研究。隨著這項技術的逐漸成熟,其在體內藥物分析樣品的處理中的地位將變得越來越重要。

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